试管婴儿和胚胎冻融技术

“全面二孩”放开后，想生二孩的家庭多了起来。随着我国冻存时间最长的冻融胚胎试管婴儿诞生的消息，引起了人们的关注。就什么是胚胎冻融技术，冷冻胚胎孕育的孩子健康受不受影响，一代、二代、三代试管婴儿有什么不同，记者采访了唐都医院生殖中心的有关专家。

事件还原

李女士因输卵管阻塞和多囊卵巢综合征，在唐都医院生殖医学中心进行试管婴儿技术助孕治疗。2003年8月，她成功取卵12枚，并形成12枚胚胎，移植2枚，冷冻7枚，当月助孕成功，2004年产下一名体重2900克的健康男婴。而剩下的7枚胚胎就一直在唐都医院生殖医学中心，利用当时常用的程序化冷冻胚胎技术进行冻存保存。2015年，随着二胎开放政策的实施，李女士再次来到唐都医院，想要通过冻融胚胎试管婴儿技术再圆二胎梦。经过一系列检查，她的身体条件适合再次接受试管婴儿技术助孕，但由于当时技术条件限制，李女士的胚胎是用程序化冷冻胚胎技术进行冻存的，和目前使用的玻璃化冷冻技术，其解冻过程中的胚胎培养液完全不同。为了使胚胎成功复苏，王晓红主任和她的团队，为李女士的胚胎专门定制了适合程序化冷冻技术的特殊培养液，经该培养液培育后，7枚胚胎有3枚存活，从中选择了2枚移植，当月就助孕成功，今年2月24日上午9时03分，李女士剖腹产产下一名重3440克的健康男婴。

什么是胚胎冻融技术

“胚胎冷冻技术是辅助生殖技术重要的衍生技术之一。”唐都医院人类辅助生殖技术实验室负责人李博说，这是在试管婴儿新鲜取卵治疗周期中，胚胎移植后剩余的可利用胚胎进行冷冻保存，并在适当的时机进行胚胎解冻，将冻融胚胎移植使患者受孕的一项技术。

这项技术主要适用于新鲜周期因并发症或其它原因不适合胚胎移植的患者；新鲜周期胚胎移植后优质胚胎还有剩余的患者；新鲜周期可用胚胎少，有积攒胚胎要求的患者；反复新鲜周期移植后种植失败的患者和为进行胚胎植入前遗传学筛查的患者。对于患者而言，新鲜周期移植后，剩余可用胚胎可以冷冻保存，避免胚胎浪费，如果新鲜移植周期失败或流产，患者可以再次移植冷冻胚胎，避免再次促排卵治疗，降低费用，减轻痛苦，一旦患者在新鲜周期发现感冒、发热、白细胞升高、肝功异常、孕酮提前阳性、子宫内膜过薄等不利因素时，冷冻胚胎可以为患者提供治疗时间，以便提高移植成功几率。

冻融胚胎孕育有没有年龄限制

唐都医院生殖医学中心主任王晓红说，妇女的生育力一般在35岁以后开始下降，在40岁以后下降明显，主要是卵巢功能下降，卵子闭锁加速，反应性差，因而治疗效果差。最佳的生育年龄在35岁以前，即使要二胎，年龄最好也不要超过40岁。年龄越大，在孕育胎儿的过程中，风险也会增大。

目前使用的是胚胎玻璃化冻融技术

唐都医院人类辅助生殖技术实验室负责人李博告诉记者，当时只有程序化冷冻法，随着技术改革，2009年更改为玻璃化冷冻法。胚胎玻璃化冻融技术是指将早期胚胎经特殊处理后，与高浓度冷冻保护剂放在承载工具上，直接投入液氮中，在极快的降温（＞2000℃/min）过程中，细胞内外均不形成或极少形成冰晶，胞内仍保持液态时的分子和离子分布的一项新技术。与传统的程序化冻融技术相比，具有简便、快速、经济和避免细胞内外冰晶形成；可获得较高的胚胎复苏存活率，为配子和胚胎在体外的保存提供了更可靠的保障。

冷冻胚胎孕育的孩子健康不受影响

冷冻了这么多年的胚胎，能孕育出健康的宝宝吗？很多人会有这样的疑问，对此，李博说，冷冻胚胎保存在-196℃的液氮中，温度是恒定的，理论上胚胎的代谢已经停止，可以无限期保存。目前，在临床上七八年，甚至十多年的冷冻胚胎孕育手术都还在做，没有证据证明冷冻胚胎孕育的孩子，在智力、体力、健康程度上就要差于新鲜胚胎分娩的孩子。

在试验过程中通过对小白鼠的胚胎进行3至5次的反复冻融，都是没有问题的。国外有位专家也是用动物胚胎做研究，对一个胚胎反复做了100次的冻融，结果显示，胚胎没有受到损伤。胚胎复苏后，会经过形态发育以及动力学等一系列检测，完全合格后才会植入患者体内。理论上讲，能够复苏的胚胎且检测后各项指标均合格，没有事例证明生出来的孩子不健康。

截至目前，唐都医院共为23000多对不孕不育患者的近10万枚胚胎进行冷冻，共计解冻胚胎27000余个，解冻复苏率存活率高达95%，移植近13000例患者，出生了4293个健康婴儿。近一年冻融胚胎移植的临床妊娠率高达60%以上，达到国际先进水平。

什么是一代、二代、三代试管婴儿

说了冻融技术，不得不提的就是试管婴儿。试管婴儿，医学术语又叫体外授精和胚胎移植技术，是指从女方的卵巢内取出卵子，在实验室的恒温箱内让它们与男方的精子结合，形成早期胚胎，再将它移植入女方子宫内的助孕方法。恒温箱充当了输卵管的功能，让精子与卵子在里面相遇、结合，孩子是在母亲的子宫内长大的。

唐都医院生殖医学中心主任王晓红说，很多患者在就医时会要求医生为自己使用第三代试管，认为最新技术就是最好的技术，这是一种误区。随着试管婴儿技术的发展，新的技术是为了解决更复杂的疑难问题。采取什么样的方案治疗是要根据患者的具体情况来制定的，一代、二代、三代试管婴儿都有具体的适应人群。我们常说的“第一代试管婴儿”、“第二代试管婴儿”、“第三代试管婴儿”是指技术的演变。

体外受精-胚胎移植技术，俗称第一代试管婴儿技术，是将不孕夫妇的精子和卵子取出，在体外完成受精和胚胎的早期发育，然后将早期胚胎放回母亲子宫内，使其继续发育、生长直至足月分娩。该技术的适应症，主要包括女方各种因素导致的配子运输障碍（如输卵管梗阻；输卵管通畅不良伴积水；输卵管结核；输卵管与周围组织粘连；盆腔粘连等）；女方排卵功能障碍；子宫内膜异位症；不明原因的不育；人工授精失败术后等。因此，第一代试管婴儿技术主要解决了因女性因素引起的不孕。

卵胞浆内单精子显微注射技术，即我们所谓的第二代试管婴儿技术，是采用显微操作仪，对离体卵子进行显微操作，将单个精子注入卵母细胞胞浆内，以完成体外受精的一项辅助生殖新技术。该技术的适应症主要包括，少、弱畸形精子症；不可逆的梗阻性无精子症；生精功能障碍；精子顶体异常；前次IVF受精率低于30%；需行种植前遗传学诊断技术的患者等。因此，第二代试管婴儿技术主要解决了因男性因素引起的不育问题。

胚胎植入前遗传学诊断与筛查（PGD/PGS）试管婴儿，俗称“第三代试管婴儿”，是分子生物学与体外受精相结合的产物。这项技术能够在胚胎发育至第3天或第5天时，一次性对其46条染色体进行诊断或筛查，排除带有遗传性疾病或染色体数目和结构异常的胚胎，选择未见异常的胚胎植入母体子宫，从而提高患者的临床妊娠率，降低流产率，最大程度避免出生缺陷的风险。适用于生育过染色体异常出生缺陷患儿的患者、孕早期反复自然流产患者、反复试管婴儿技术胚胎着床失败患者、亲代染色体异常患者和有单基因病遗传高风险的家庭等。

聚合酶链式反应（PCR）、荧光原位杂交技术（FISH）、染色体微阵列技术（CMA）、高通量测序技术（NGS）等分子生物学技术均可用于不同目的的PGD/PGS检测。目前NGS是最先进、适用性最广的一项检测技术，这项技术具有通量大、时间短、精确度高、信息量丰富和能够发现新的基因突变、基因融合等优点。